2022检验主管技师考试考点|ELISA技术中常用的酶及底物

参加临床医学检验职称考试的各位考生们，为了帮助大家熟悉检验主管技师考试题型，掌握答题技巧，中公医考网的小编特意为大家搜集整理如下检验主管技师考试常考考点——钾代谢与酸碱平衡的关系：

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ELISA是酶免疫技术中非常重要的临床应用，在各种微量物质的检测中发挥着非常重要的作用，比如各种肝炎病毒，细胞因子，细菌毒素等，而其常用的酶及底物也是需要大家记忆的考点，在检验技士考试中有很重要的考题。

ELISA常用的酶有辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶等。首先对于辣根过氧化物酶主要来源于蔬菜植物辣根中，是由无色的糖蛋白和亚铁血红素结合而成的复合物。HRP是目前在酶联免疫吸附试验中应用最为广泛的标记用酶。HRP的底物常用的有邻苯二胺(OPD)和四甲基联苯胺(TMB)。OPD被认为是HRP最为敏感的色原底物之一。TMB已成为目前ELISA中应用最广泛的底物;碱性磷酸酶(AP)是一种磷酸酯水解酶，可以从大肠杆菌或小牛肠黏膜提取。AP的底物常用对硝基苯磷酸酯(p-NPP);β-半乳糖苷酶(β-Gal)来源于大肠杆菌，分子量540kD，最适pH6～8.因人血中缺乏此酶，以其制备的酶标志物在测定时不易受到内源性酶的干扰，从而提高特异性，被用于均相酶免疫测定中。β-半乳糖苷酶的底物常用4-甲基伞酮基-R-D半乳糖苷(4-MUU)，酶作用后，生成高强度荧光物4-甲基伞酮，其敏感性较HRP高30～50倍，但测量时需用荧光计。

这三类酶及其对应底物是需要大家做到区分记忆的，尤其是辣根过氧化物酶及其底物经常会出现在考题中。

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