2022检验主管技师考试考点|酶联免疫吸附试验

基本原理

将受检样品（含待测抗原或抗体）和酶标记抗原或抗体按一定程序与固相抗原或抗体反应形成抗原抗体复合物；用洗涤的方法将固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例；加入底物后，酶催化底物变成有色产物，通过定性或定量检测有色产物量即可确定样品中待测物质含量。

方法类型

方法名称

酶标物质

检测物质

重要考点

双抗体夹心法

抗体

抗原

是检测抗原最常用的方法，适用于检测含有至少两个抗原决定簇的多价抗原。

双位点一步法

抗体

抗原

当待测抗原浓度过高时，过量的抗原可分别同固相抗体和酶标抗体结合而抑制夹心复合物的形成，出现钩状效应（hook effect），显色降低，严重时可出现假阴性结果。必要时可将标本经过适当稀释后重复测定。

竞争法

抗原或抗体

抗体或抗原

结合于固相载体上复合物中被测定的酶标抗原的量（酶活性）与样品或标准品中非标记抗原的浓度成反比。

间接法

抗体

抗体

检测抗体最常用的方法，该法只需更换固相抗原，就可用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体，具有更广的通用性。

捕获法

抗体

IgM

目前最常用的是病原体急性感染诊断中的IgM型抗体。

临床应用

ELISA广泛用于传染病的诊断，病毒、细菌、也用于一些蛋白质的检测，如各种免疫球蛋白、补体、肿瘤标志物（甲胎蛋白、癌胚抗原等）。