检验学专业基础知识：放射免疫分析法原理及影响因素

放射免疫分析的原理：就是利用放射性核素标记抗原或抗体，然后与被测的抗体或抗原结合，形成抗原抗体复合物的原理来进行分析的。它又分为两种方法。

一、竞争性RIA，又称传统RIA

主要特点：标记的是抗原。其原理：未知抗原Ag*标记抗原Ag*已知定量抗体Ab标记抗原与抗体复合物AgAb*未知抗原与抗体复合物AgAb*游离标记抗原Ag(去除)(未知抗原多，标记抗原与定量抗体结合的复合物就少，表现为负相关)。

二、非竞争性RIA，又称免疫放射分析(IRMA)，主要特点：标记的是抗体。按反应原理分为两种：

1.单位点IRMA：所测的抗原为小分子抗原。

2.双位点IRMA：从加样测定顺序上看，有三种方法：正向两步法;反向两步法;一步法，又称同时加样法)。这三种方法都生成夹心状的抗体-抗原-抗体复合物，故又称双抗体夹心法。糖类抗原CA50，CA125就用的是其中的第三种方法(一步法)。

三、RIA法的影响因素：pH和离子强度;反应温度，温度一般为37℃，也有45℃，室温，4℃冰箱;反应时间，操作中的注意事项：戴手套、防护镜等，将试剂盒从冰箱中取出，室温下放置30min方可使用。

非竞争性RIA法中，清洗固相包被珠时，清洗次数要严格按说明书中所要求来操作，不得减少。虽然RIA法的影响因素很多，但操作中只要注意上述事项，RIA法的稳定性还是相当不错的。主要是它存在放射污染，这个问题不易解决，影响了它以后的发展，如今电化学发光免疫分析，化学发光免疫分析，酶联免疫分析，磁酶免疫分析等相继推出，发展很快。RIA法将被淘汰。