沉淀实验方法学分类是临床免疫学检验当中的一个常考考点,其涉及的考查内容包括:沉淀反应的特点、液体内沉淀实验和固体(凝胶)内沉淀试验等。下面我们从如何加强记忆的角度来学习一下沉淀实验方法学分类的一些记忆方法。
一、沉淀反应的特点:
1.参加沉淀反应的抗原为可溶性物质。
2.反应阶段:
|
阶段 |
反应特点 |
时间 |
是否可见 |
|
第一阶段 |
抗原抗体特异性结合 |
几秒到几十秒完成 |
可溶性小复合物,肉眼不可见 |
|
第二阶段 |
可见的免疫复合物 |
约需几十分钟到数小时完成 |
肉眼可见,如沉淀线、沉淀环 |
我们通过表格对比本部分知识点后会发现,第一阶段是以“秒”为单位,第二阶段是以“分钟”为单位,而且需要一定的反应时间才能看到沉淀,所以在做题时我们只需要找到相应的时间特点,即可快速选出正确答案。
二、液体内沉淀实验:
1)抗原稀释法(Dean-Webb法):将可溶性抗原作一系列稀释就行反应。
2)抗体稀释法(Ramon法):将恒定的抗原量与不同程度稀释的抗体反应。
3)方阵滴定法。
本部分考试涉及较少,很少针对具体概念进行深入考核,常在其他沉淀实验中作为干扰选项出现,如:固体(凝胶)内沉淀试验的各种试验方法之间进行综合考核鉴别,同学们加以区分即可。
三、固体(凝胶)内沉淀试验
1.单向扩散试验
| 项目 | 适用范围 | 注意事项 | |
| 单向扩散试验 | Mancini曲线 | 大分子抗原和长时间扩散(>48h) | ①抗血清必须特异性强、效价高、亲和力强,在良好的条件下保存。②每次测定都必须做标准曲线。③每次测定时必须用质控血清做质控。④注意双环现象(出现两种抗原性相同成分)。⑤用单克隆抗体测量多态性抗原时,测定值偏低;应用多克隆抗体测量单克隆病时,测定值偏高。 |
| Fahey曲线 | 适用于小分子抗原和较短时间(24h)扩散 | ||
本部分常考的知识点为两个曲线项目各自的适用范围,我们通过表格的形式对比本部分知识点后会发现,Mancini曲线适用于大分子抗原和长时间扩散,Fahey曲线适用于小分子抗原和较短时间扩散,在记忆时只需记住Mancini的字母数量大于Fahey的字母数量,所以Mancini为“大”、“长”,Fahey为“小”、“短”,在做题时我们只需要找到相应的英文缩写,即可快速选出正确答案。
2.双向扩散试验
|
项目 |
结果判断 |
|
|
双向扩散试验 |
抗原或抗体的存在与否以及相对含量的估计 |
①沉淀线如果靠近抗原孔,则表示抗体含量较大; |
|
抗原或抗体相对分子量的分析 |
①沉淀线弯向分子量大的一方; |
|
|
抗原性质的分析 |
①两条沉淀线互相吻合相连,表明抗体与两个抗原中的相同表位结合而沉淀,两个抗原相同; |
|
|
抗体效价的滴定 |
抗原和抗体皆作不同的稀释,经过自由扩散形成沉淀线,以出现沉淀线的最高抗体稀释度为该抗体的效价。 |
|
|
抗原或抗体纯度鉴定 |
出现一条沉淀线说明待测抗原或抗体纯,出现多条沉淀线说明不纯。 |
|
本部分考题相对来说考核较少,同学们在学习是可以先以画图的形式理解,再加以鉴别即可。在记忆时,可以把沉淀线看做为“<”“>”,即沉淀线弯向抗体的一方记忆为“抗体>抗原”,如此在做题时即可快速选出答案。
以上就是沉淀实验方法学分类这部分,关于沉淀反应的特点、液体内沉淀实验和固体(凝胶)内沉淀试验的核心考点归纳,同学们在复习时要善于总结归纳,抓住核心知识点,这样才能更有效地提升自我。

微信好友
朋友圈