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2021医疗招聘考试检验学资料:血细胞计数

来源:中公卫生
2021-05-24 15:40:21
873
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血细胞是指外周血中的红细胞、白细胞和血小板的总称。而白细胞又包含五种,分别是中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞和淋巴细胞。血细胞的计数通常选用牛鲍计数板法来镜下检查。

改良牛鲍计数板结构中高度为0.1mm,容积0.1μl;不同的细胞计数区域不同,白细胞计数区为四角大方格-单线,16中;红细胞和血小板计数区为中央大方格四角和中央-双线,25中,每中单线16小;其总的技术原则是压线细胞,数上不数下,数左不数右。

不同细胞计数之前需要进行稀释处理,常用的稀释液也是考试中常考考点,整理如下:

 

稀释液

成分及作用

RBC

Hayem液氯化钠(NaCl---调节渗透浓度

硫酸钠(Na2SO4---防止红细胞聚集

氯化高汞(HgCl2---防腐剂,有毒

网织红细胞

WHO推荐新亚甲蓝

煌焦油蓝乙醇溶液---玻片法

煌焦油蓝生理盐水溶液---试管法

白细胞

稀乙酸溶液破坏成熟红细胞

嗜酸性粒细胞

保护剂:乙醇、丙酮、乙二醇

着色剂:溴甲酚紫、伊红、固绿等

破坏其他细胞和增强E着色物质:碳酸钾、草酸铵

抗凝剂:枸橼酸钠、EDTA

防止乙醇和液体挥发剂:甘油

 

血细胞的形态观察通常选用涂片法来镜下观察,因此血涂片的制备以及染色方法的选择,也是考点所在。记忆口诀为:二法,四因素,五标准。

1.二法

①手工推片→25°~30°夹角

②厚血膜涂片→疟原虫、微丝蚴

2.四因素

①血滴大小

②推片与载玻片间夹角

③推片速度

④血细胞比容

3.五标准

一张良好血片

①厚薄适宜

②头体尾明显

③细胞分布均匀

④血膜边缘整齐

⑤并留有一定空隙

血涂片制备完成后还需要进一步进行血液细胞染色,目前有两种染色方法,但最常用最简便的为-瑞氏染色法。

1.瑞氏染料(ME)

酸性伊红与碱性亚甲蓝溶解于甲醇。

2.染色原理

物理吸附与化学亲和作用

嗜酸性物质→伊红+Hb、嗜酸性颗粒

嗜碱性物质→亚甲蓝+细胞核蛋白、L及B胞质

3.pH值的影响

磷酸盐缓冲液(pH6.4~6.8)

①pH

②pH>pI→Pr带负电荷多→易与M+结合→染色偏蓝

4.方法学评价

瑞氏染色法:最经典最常用。细胞质、中性颗粒染色效果好。

吉姆萨染色法:细胞核、寄生虫(如疟原虫等)着色较好。

贮存时间愈久,染色效果愈好。

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