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执业药师备考考点:紫外-可见分光光度法

来源:
2014-08-22 11:23:34
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2014年执业药师考试药理学考点,中公医考网为您整理编辑
基本原理:

紫外一可见分光光度计的基本结构:

用于紫外一可见分光光度法分析的仪器为紫外一可见分光光度计,由光源、单色器、吸收池和检测器及数据处理系统组成,分述如下:

(1)光源 光源的作用是提供一定强度、稳定且具有连续光谱的光。紫外光区通常采用氢灯或氘灯,可见光区采用钨灯或卤钨灯。

(2)单色器

(3)吸收池

(4)检测器 常用的检测器有光电倍增管和硅光二极管阵列等。它们都可将接受的光信号转变为成比例的电信号,信号再经过处理和记录就可以得到紫外一可见吸收光谱或吸光度的测定值了。

测定方法:

为吸光度测定的性,《中国药典》对吸光度的测定有以下一些要求。

1.对溶剂的要求 供试品的吸光度通常是配成溶液后测定。所用溶剂除能充分溶解样品、与样品无相互作用、挥发性小外,在测定波长处的吸光度也应符合要求。

2.空白对照校正 吸光度的测定实际上是透光率的测定,透过光强度的减弱不仅是供试品溶液的吸收所致,还与溶剂和容器的吸收等因素有关。因此测定吸光度时,均应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照进行校正,以扣除这些因素的影响。

3.测定波长的检查 为保障测定的可靠性和性、减少测定误差,吸光度的测定一般在大吸收波长(Amax)处进行。测定时,为了核对供试品溶液吸收峰的位置是否正确,除另有规定外,应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照,用1em的石英吸收池,在规定的吸收峰波长4-2nm以内测试几个点的吸光度,或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定,以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确。

4.供试品溶液的浓度 供试品溶液浓度的选择,应使吸光度读数在0.3~0.7之间为宜。因为,在此范围内吸光度测定的相对误差较小。应根据吸光度的范围要求和药物的吸收系数,将供试品溶液配制为适宜的浓度。

5.仪器狭缝宽度的选择

应用:

 

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