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放射免疫分析与免疫放射分析的区别
放射免疫分析技术是标记免疫技术中非常重要的一种,其又分为放射免疫分析与免疫放射分析两种。对于二者的区分是考试中非常重要的一部分内容,所以需要将这部分知识点进行鉴别记忆。
早期的放射免疫技术是基于竞争性结合反应原理的放射免疫分析,稍后又发展了非竞争性结合的免疫放射分析。放射免疫分析是以放射性核素作示踪剂的标记免疫分析方法,它具有高度灵敏性、特异性和精确性等特点,特别适用于激素、多肽等含量微少物质的超微量分析。经典RIA是采用标记抗原和非标记抗原竞争性结合有限量特异性抗体的反应。免疫放射分析(IRMA)是以过量125I标记抗体与待测抗原进行非竞争性免疫结合反应,用固相免疫吸附剂对B或F进行分离,其灵敏度和可测范围均优于RIA,操作程序较RIA简单。两者的区别点见于:
项目 |
RIA |
IRMA |
标志物 |
核素标记抗原 |
核素标记抗体 |
反应速率 |
较慢 |
较快 |
反应原理 |
竞争抑制性结合,反应参数与待检抗原量成反比 |
IRMA为非竞争性结合,反应参数与待检抗原浓度呈正相关 |
特异性 |
较低 |
采用针对不同抗原决定簇的双抗体结合抗原,反应不易受交叉反应物的干扰,测定特异性较高 |
灵敏度 |
RIA中标记抗原和待检抗原竞争,与有限量抗体的结合不充分,较低 |
抗原与抗体属非竞争性,微量抗原能与抗体充分结合,较高 |
检测范围 |
窄 |
较RIA宽1~2个数量级 |
应用 |
测定大分子和小分子抗原 |
只能测定至少有两个抗原决定簇的抗原 |
其他 |
所用抗体为多克隆性,因此对其亲和力及特异性要求较高,但用量很少 |
为试剂过量的非竞争性结合反应,对抗体亲和力的要求不及RIA,但用量大 |
所以考试中也经常会将两者的特点进行混淆,希望大家能做到熟记。
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